蓝耳活疫苗为什么需要培养成高代次

蓝耳病（猪繁殖与呼吸综合征）是免疫抑制病，给养猪生产带来了许多问题，这么多年以来，无论是欧美国家，还是我国，考虑疫苗控制的效果很难评估，存在着很多争议。广东永顺生物制药股份有限公司跟中国兽医药品监察所为了摸索2006~2007年以来高致病性猪繁殖与呼吸综合征问题的有效解决，从安全性、免疫原性、同源性等方面，进行了长达9年的研究，发现通过Marc-145细胞培养高代次弱毒苗，可以很好地解决目前困扰的生产损失。在这里，我们谈谈高代次减毒疫苗的必要性。

我们知道，在上个世纪50年代，中国兽医药品监察所为了解决猪瘟问题，通过家兔传代培养了480代的C株弱毒疫苗，该疫苗在预防和控制猪瘟疫病起到重要作用。1957年我国将该毒株赠送给匈牙利等国，匈牙利将C株与英、美的商品苗进行比较，证明C株比其他几种更安全有效，其后逐步被欧洲各国所采用，曾先后在东德、西德、波兰、匈牙利、罗马尼亚、越南、朝鲜、意大利等十几个国家应用，对控制和消灭猪瘟流行起到重大作用。根据猪瘟活疫苗的作用机理，我们确定了蓝耳活疫苗的研制方向，主要是考虑细胞免疫与体液免疫如何协同作用，尽快控制疫情与持续保护猪群。

C株猪瘟活疫苗能够在接种后5天左右产生强有力的细胞免疫，尽管跟现有流行毒株仅存在一定的同源性，交叉保护力却得到了很好的发挥，关键在于疫苗毒抗原递呈给T细胞的作用没有受到影响。因为，高代次培养让猪瘟活病毒失去了致病力，仍然保留很好的免疫原性。以中和抗体为主的体液免疫在免疫后逐渐产生，28天左右达到了一定的峰值，然后持续好几个月，可以中和野毒的不断侵扰，达到持久保护的效果。这是实践应用中所观察到的现象，对于解决猪瘟病毒给猪群带来的影响非常有意义。

蓝耳病毒在Marc-145细胞的培养较易适应，通过Marc-145细胞连续传代可以将毒株致弱，这在国内外已有先例得以证实，一些毒株往往在过多传代后，毒株致病性没有了，免疫原性也丢失了。传代致弱过程中，我们通过对病毒作一些特殊的处理，促使广东强毒株（GD）在减毒培养中能保留很好的免疫原性，而不至越传代免疫原性越弱，为高代次培养奠定了良好的基础。

我们在2007~2009年做了大量的实验室研究，突破了120代减毒的瓶颈，一直传到200代，然后通过攻毒保护试验发现，当传到140代时，已经失去了致病力，并且在195代仍然保留完全的免疫保护力。我们还做了很多安全评估，例如，同居感染试验不产生水平传播，重胎母猪免疫没有出现垂直传播，活猪回传5代没有出现返强现象，10倍超剂量免疫没有体温反应、肺部损伤、生长减慢等副反应。

我们再回顾C株猪瘟活疫苗，将346代毒连续通过易感乳猪7代，毒力不返强，免疫猪4~32天尿中不排毒，60天内不发生接触感染，然后几十年以来，几乎所有欧洲国家和少数拉美国家都采用了猪瘟C株消灭和控制了猪瘟，猪瘟C株是一株国际上公认效果最好、免疫力最坚强、保护效率最持久、遗传性稳定、无残余毒力、对各种日龄安全、不返强的毒株。关键在于高代次培养。

GDr180由于充分致弱，没有致病力、不散毒、无返强，在接种猪只后不影响抗原递呈，很快产生了交叉保护力较强的细胞免疫，能够压制住疫情，同时由于同源性比较接近，持续保护猪群不受蓝耳病流行野毒的侵扰。

GDr180在田间应用的效果主要体现在两个方面，一是直接免疫或由其他疫苗毒株转用后猪群没有出现波动；二是逐渐恢复猪群的健康度，并保持良好的生产成绩。希望我们的高代次蓝耳活疫苗能够给养猪生产者带来很好的效益，因为2009年广东永顺已经研制出中试疫苗，通过大量的临床研究，得到了很好的实证。