复合酸化剂在水中的抑菌作用

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日期：2017-08-16 14:54
来源：正典生物

肉鸡养殖中细菌性疾病的发生（如大肠杆菌感染等）往往与养殖环境不良有关，而供水系统清洁不彻底，水中菌落总数超标则是其中一个重要因素。由于大多数致病菌最适宜生长的pH值在6.0-8.0之间（见表1），而在酸性环境中，致病菌则难以生长繁殖。根据此理论基础，佛山市正典生物技术有限公司研发生产出复合液体酸化剂“酸溜溜”。其主要成分为甲酸、丙酸钠、乙酸、柠檬酸。“酸溜溜”在添加进饮用水中之后，可使饮用水长时间保持pH值在4.1左右，达到抑制致病菌生长的目的。

作者：谢德华、钟新林、林一村

▼表1 不同致病菌最适生长pH值

为了验证“酸溜溜”的抑菌效果，2017年6月我们在某大型养殖公司随机抽取了三家肉鸡养殖户，从鸡舍中收集了三份鸡饮用水样品，委托华南农业大学寄生虫教研室对水样进行菌落总数检测，并同时进行“酸溜溜”的抑菌效果试验。

一、试验方案

空白对照组：直接取水样进行细菌培养和菌落计数，LB培养基上计数结果作为水样菌落总数检测结果；麦康凯培养基上计数结果为水样疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数。

实验组：在每份水样中分别以1：500、1：1000和1：2000三种稀释倍数加入“酸溜溜”，作用1小时、2小时和3小时后，取水样在LB培养基和麦康凯培养基上分别进行细菌培养并作菌落计数。计数后与空白对照组比较，观察抑菌效果。

二、实验材料

水样（采自三家肉鸡养殖户，样品A和样品C采自水线，样品B采自鸡舍内水龙头）、“酸溜溜”、LB培养基、麦康凯培养基。

三、实验结果

▼表2 酸溜溜作用后水样的培养基平板菌落计数（单位：CFU/mL）

1、水样菌落总数检测

由表2空白对照组LB培养基计数结果可见，样品A菌落总数>200CFU/mL（数量过多无法精确计算），样品B水样菌落总数为67 CFU/mL，样品C菌落总数为153 CFU/mL。麦康凯培养基上计数结果显示样品A疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数>200 CFU/mL，样品B疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数为0 CFU/mL，样品C疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数为2 CFU/mL。

2、酸溜溜抑菌效果试验

由表2实验组LB培养基上计数结果可见，除样品A 因菌落总数过多，1：1000和1：2000稀释实验组无法看出是否有抑菌效果外，其余各实验组菌落总数均少于与空白对照组，且菌落总数随酸溜溜作用时间增长而减少。图2为样品C空白对照组和实验组（LB培养基作用3小时），可见“酸溜溜”在作用3小时后，抑制样品C中大部分细菌的生长。

由表2实验组麦康凯培养基上计数结果可见，除样品C 1：2000稀释度作用2小时实验组菌落数与空白对照组一样，其余样品A和样品C实验组疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数均少于实验组，且“酸溜溜”浓度越高，作用时间越长，菌落数越少。图3为样品A空白对照组和实验组（麦康凯培养基；作用3小时），可见加入“酸溜溜”后疑似大肠杆菌和沙门氏菌菌落数少于空白对照组，且“酸溜溜”浓度越高，菌落数越少。

▲图1 样品A空白对照组和实验组（LB培养基；作用3小时）

▶从左到右平皿分别对应：空白对照组、1：500稀释度、1：1000稀释度、1：2000稀释度。

▲图2 样品C空白对照组和实验组（LB培养基；作用3小时）

▶从左到右平皿分别对应：空白对照组、1：500稀释度、1：1000稀释度、1：2000稀释度。

▲图3样品A空白对照组和实验组（麦康凯培养基；作用3小时）

▶从左到右平皿分别对应：空白对照组、1：500稀释度、1：1000稀释度、1：2000稀释度。

四、讨论和结论

本次实验两份采自水线的样品（样品A和样品C）菌落总数超过国家生活饮用水微生物指标（≤100CFU/mL），而采自水龙头的样品（样品B）菌落总数符合国家标准。采样过程中我们也发现养户疏于清洗供水设备，蓄水桶、饮水器均有大量水垢和污垢（见图4、图5），水中也含有大量白色絮状物。可以推测鸡舍的供水设备污染是水中菌落总数超标的原因。

▲图4、图5 养户用于蓄水的水桶和饮水器，可见有大量水垢和污物。

“酸溜溜”在1：2000~1：500的稀释度下可以不同程度地抑制水中细菌的生长，而且对疑似大肠杆菌和沙门氏菌有抑制效果。“酸溜溜”作用时间越长，浓度越高，抑菌效果越好。本次实验中样品B和样品C实验组在加入“酸溜溜”3小时后，菌落总数相比空白对照组减少78%~98%（样品A菌落总数过大，未能精确计算，不做讨论）。由此可见，“酸溜溜”能够有效抑制水中细菌的生长，改善水质，从而减少鸡群对致病菌的摄入，降低细菌性疾病发生的风险。因此建议在肉鸡养殖过程中定期添加酸溜溜，减少水中菌群数量。

建议使用方案

① 改善肠道状况，可从20天龄开始按1:1000比例加入蓄水池中，饮用6小时，连续使用5至7天，间隔10天后再用5至7天；

② 水质欠佳，水源中细菌数偏多的区域，可以按1：2000比例长期添加；

③ 注意供水设备的卫生状况，定期使用氯制剂（“28络合氯”等）进行清洗。

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