于博：非洲猪瘟的净化方案

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日期：2020-09-01 08:34
来源：《猪业》2020年第4期【非洲猪瘟两周年启思录】专题系列文章

非洲猪瘟的净化方案

于博

华南农业大学兽医学院

非洲猪瘟自2018年8月初传入我国，给我国的养猪业带来巨大损失。经近两年的不懈努力特别是较大规模的养猪企业产能恢复较快，摸索出一套适合我国养猪生产实际的以生物防控和检测剔除为核心的净化方案。

虽然因不同地域和自然条件、不同硬件和饲养条件、甚至不同养殖体系间，在具体策略和操作细节上有所区别，但净化方案的核心内容基本一致。

净化方案包括两方面：一方面完全封场封群后，应用qPCR等敏感度高的抗原检测方法确定并剔除抗原阳性猪只，必要时防御性剔除风险较高的密切接触猪只，同时配合高效环境消毒杀灭残存病原；另一方面防范病原再次侵入，包括安全漏洞查找排除，风险点评估，硬件设备改造，人员培训与管理提升等。

以猪场内部净化为突破点，以点带面实现养殖小区净化和区域净化，猪场内净化方案的基本操作框架总结如下：

一、检测剔除工作的必要准备

1.必要的采样和检测设备（qPCR仪等）、采样器具、检测试剂、人员培训，也可外聘检测团队驻场进行。

2.阳性猪只的移除工具，临时隔离工具和材料（塑料板、塑料布等），无害化处理机械和器具。

3.消毒设备和消毒剂，如火焰消毒设备和烘干机，醛类消毒剂等敏感高效消毒剂和烧碱等常用消毒剂。

4.人员动员、培训与工作分工。

5.场内携带者（如老鼠、苍蝇、其它虫类）灭杀器具、药物。

6.充足的机动栏舍。

7.其它闭群生产的必要物资和场内人员的生活物资等。

二、净化方案实施

1.采样

采样方法：猪只的检测常用拭子法采集口腔液和鼻液，通过检测唾液和鼻液能在病毒感染早期及时发现阳性猪只。

口腔液与鼻液检出时间往往早于血液、粪便等样品，同时具备易于采集及对猪只惊扰和损伤较小等优点，而被普遍采用。发病后期也可采用耳尖血拭子和静脉血等采样检测以做验证。环境检测中常采用无菌纱布擦涂法对环境或疑似物品表面进行多点擦涂采样。对于饲料、水源等病毒量小而猪摄入风险高的样品还要用相应方法做病毒样品浓缩富集以提高检测的准确性。对猪只的采样应以每头猪为采样单位，操作前后消毒和更换采样器具，避免采样过程中的人为传播风险。

采样策略与混样：采用群体普检、随机抽检、病例抽检等采样策略相结合，在实际工作中往往从有症状的病例检测发现问题，进一步普检进行检测剔除，结合随机抽检来评估猪群风险和剔除效果。为提高效率降低成本，预估阳性率较低（比如1%以下）可做10混样或5混样初检，发现阳性样品再个体检测，但混样的检测限会有所提高，为保证感染猪只的早期发现，一般不要超过20混样。

2.阳性个体的发现

虽然口腔液、鼻液和血液等样品应用qPCR的方法检出时间早于临床典型症状的时间，但实际操作中，除了群体普检外，往往会结合前驱期症状发现可疑猪只进行检测。

减料、拱料不食等早期症状及发热、昏睡、皮肤出血等典型症状的发现可以锁定可疑个体，为早期发现感染猪只、减小传播扩散风险赢得时间。

比如用自动设备饲喂的孕怀舍可在投料后10分钟到15分钟，巡栏观察，减料、供料不吃的猪只作标记、禁止猪只移动、测量体温、用挡板隔离、采样等操作。其它猪群也根据具体情况，进行类似观察、隔离、采样等。培训一线员工现场观察发现可疑猪只并及时隔离和采样，现场与实验室检测密切配合是做好剔除工作的重要保证。

3.样品的储运与检测

样品应密封包装，冷藏运输和递送，并及时检测。检测仪器和试剂应采用中国动物疫病预防控制中心专家评审推荐的相关产品，检测工作应严格按照仪器和试剂说明书的操作流程和判定标准进行。由于qPCR检测方法很敏感，实验室应分区管理避免由实验室污染造成的假阳性。如果事发突然或较小规模的猪场也可以请专业检测团队驻场检测。

4.剔除策略

根据检测结果绘制阳性猪只分布图，并制定剔除策略。

剔除策略可分为三种，其一、配合每隔三天普检，只剔除阳性猪，阳性个体逐次减少直至全阴。其二、预防性剔除，阳性猪只的唾液等分泌物、血污、粪便排泄物能直接接触的检测阴性猪只可做预防性剔除，比如在定位栏剔除前后左右相邻猪只，在育肥舍、育肥舍剔除同栏猪只。其三、阳性个体的同群或同栋舍猪只全部清除。

由于阳性的猪只可能已经排毒污染环境并感染其它猪只，导致样品中病毒量在检测限以下但实际上已感染情况的存在，对这些猪只的准确估计是剔除的难点也是成败的关键。剔除的策略要综合考虑阳性猪只数量、分布、猪舍基建、猪舍结构、猪群密度、饲喂饮水方式、通风排污等实际情况科学考量，灵活应用以上三种策略达到高效和精准剔除。

一般来说发现越早、检测阳性率越低剔除的成功率越高，阳性率在2%以下剔除效果较好。若阳性率超过10%，由于猪只已大量排毒，环境污染严重，剔除效果较差。如有必要对于阳性率较高的猪群，可移出阴性猪只到其它机动猪舍即反向剔除。如果阳性个体在分布上集中在很小区域则较易剔除，如果阳性病例分布分散则较难剔除，分散分布的猪群一般与机械携带有关，要密切管控和消除人员、老鼠、苍蝇等机械携带风险。

5.阳性猪剔除

制定剔除方案后，合理规范化剔除路线。不论是普检还是抽检，一旦个体猪只检测阳性，则必须及时移出猪群。根据猪舍和猪群实际设计剔除路线和具体操作方法，最好采用专用封闭箱体式运输车辆进行。阳性猪只剔除路线上与其它猪群转运的交叉点和高风险位置要做提前隔断和隔离，事后及时消毒。剔除后检测阳性的猪只可再采样一次和同群猪样品同时检测作为复核。

6.上报与无害化处理

检测阳性要按相关法律法规要求及时上报，阳性猪要严格按法规技术要求扑杀、并作彻底无害化处理，严禁出售或做它用，避免造成扩散。

7.抗体检测

抗体检测可以发现感染时间较长的无症状感染猪或抗原转阴的猪，结合qPCR的抗原检测，可更全面评估猪群发病和流行情况。由于非洲猪瘟可发展成慢性病例和隐性带毒，一般情况下抗体阳性的猪只也要清除以消除风险。

8.栏舍与环境消毒

非洲猪瘟病毒通过空气、灰尘等传播能力较弱，少量阳性猪只被剔除后，被污染的猪舍局部地面、墙面、限位栏、金属料槽等禁止用水冲洗，可做局部火焰灼烧或烘干机消毒，其后用铺洒生石灰等方法消毒。如果范围较小可再用塑料板或塑料布等做临时隔离。已清空的栏舍或猪场可做彻底清洗和消毒。

9.管理配合

检测和剔除期间应避免猪群移动和过度惊扰，如有必要可暂停配种、疫苗注射等操作，停止冲洗栏舍，必要时可人工清理粪便。保证饲料和饮水的及时供应，做好通风保温等环境控制，适当加强饲料营养和电解多维等以抵抗应激。猪场封场封群，生产区网格化管理，设计人员和物资的合理运行，在满足基本生产要求的前提下尽量划小块区域管理，并做一定的物理隔离和隔断，做到场内网格间不交叉。通过网格化的管理，将病毒感染范围控制在最小的区域。阳性猪只极少且集中，也可以对阳性猪只所在高危区域进行“回”字形隔离管理，降低扩散风险。

三、阴性群的保持

1.选址

猪场选址要远离生物安全风险高的场所。猪场离高风险场所越近，风险越大。猪场周边疫情越重，环境污染面越广，病毒传入风险就越高。如果选址建设已成既成事实，就要加大风险的检测，提高安全等级，特别是加强场外管理、加建围墙、车辆管理等措施加以弥补。

2.回顾与改进方案

对猪场疫情发生的原因及发展过程进行认真回顾和系统分析。充分调研发病群体和发病时间、临床症状及采取的措施和效果等，结合非洲猪瘟的流行规律和猪场在生物安全上的主要漏洞筛查和分析非洲猪瘟入场的原因。制定切实可行的改进方案，并尽快行动落实。

3.猪场硬件的改造与提升

猪场生物安全体系建设应具备较为完善的基建设施和硬件设备，如封闭围墙、人员洗消通道、物资消毒通道、车辆消毒通道、物资中转和储存库房、封闭式出猪台等。另外，封闭的料塔和自动料线，卫生洁净的水源，全封闭猪舍和主动通风系统，完善的粪污处理系统和灭杀鼠、蝇、虫措施，硬化地面等条件也可以降低非洲猪瘟在场内传播风险。场内要配备专门运猪车辆，内外分开避免交叉。

4.猪场软件

猪场应制定严格的生物安全管理制度和完善的生物安全操作流程，提高员工的生物安全意识。定期对猪场各岗位进行系统全面的生物安全培训与督查。

5.生物安全等级化管理与生产区网格管理

猪场不同区域生物安全等计划管理与防控，根据实际情况把猪场围墙内外，生产区内外，猪舍内外划分成不同安全等级的区域，在出入口建设相应的人员洗消和物资消毒通道。生产区内部划分成不同的区域，甚至猪舍内部也可做划分并作相应的基建和硬件隔离，实现网格管理以避免交叉造成污染。

6.风险评估与预警

外来车辆、物资和人员不定期采样评估，场内坏境、猪舍、污物、人员、器具等定期评估，猪群定期抽检，可制作可视化图表以综合评估和判断各种风险等级并作出应对措施。结合周边疫情、季节与天气影响等因素综合判断风险并采取措施有针对性的防范至关重要。

7.实验室建设与检测常态化

为保证净化的效果，较大规模的猪场应建有规范的检测实验室以保证检测的准确性和时效性，应配备荧光定量PCR仪、离心机、核酸提取设备、冰箱等仪器设备，有经过专门培训的专业检测人员，制定系统的非洲猪瘟病毒检测方案，并做好实验室质控。把外来风险评估，异常猪、病死猪检测和猪群抽检纳入常态化管理。

8.后备进群管理

净化后的猪群，后备进群前要在隔离场（区）充分隔离，通常隔离前后都要进行检测，抗原抗体两次都是双阴才可进群。

理想状态下检测与剔除工作一般在2周到4周完成，猪群恢复阴性；根据实际情况灵活运用检测和剔除策略，应避免时间拖太长增大污染面，影响剔除效果。

保持阴性群的工作要长期坚持不懈的努力，净化后的猪群在一个月以后、半年内如又有阳性出现，则生物安全措施中存在较大隐患，需要重新提升和改进。长期的生物安全措施不但保障猪群免受非洲猪瘟的危害，同时也利于其它流行性疾病的防控和净化，比如生物安全措施在猪瘟、伪狂犬和蓝耳病的净化中也起到至关重要的作用。